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化学发光检测技术用途广,具有非常高的灵敏度
浏览次数:24发布日期:2020-01-13
 
  
  化学发光分析技术是现代微量分析方法之一,由于其灵敏度高(可达10-18mol)、简便快速(计数1秒/管)、线性好(可两点校准标准曲线)、有效期长(可达1年)、安全无害(无放射性和致畸物污染)等优点而成为取代放免和酶联的重要技术。
  
  辣根过氧化酶使试剂中的发光物(luminol)氧化并发光,而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中,将复杂的蛋白混合物经sds-page分离,并转移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫学检测,经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接(标记一抗)或间接(标记二抗)反应。
  
  在如今的Westernblot实验中,化学发光检测是常用的检测方法。相对于显色检测和荧光检测而言,它的灵敏度非常高,可达到飞克级(fg)。自从增强型化学发光(ECL)检测问世以来,这种方法就受到了全世界科研工作者的喜爱。
  
  化学发光检测通常使用的是辣根过氧化物酶(HRP)。它催化底物鲁米诺(luminol)的氧化,同时生成光信号。这些信号可通过X光胶片的曝光来检测,或直接在与化学发光兼容的CCD成像系统上获取图像。当然,后一种方式更方便,也更流行。
  
  用途:
  
  该底物试剂与碱性磷酸酶(ALP)混合后,碱性磷酸酶磷酸根水解后,底物立即发生分解反应释放出光子,在特定的碱性磷酸酶浓度范围内,释放的光子数量与溶液中碱性磷酸酶的浓度成正比,所以可以用于碱性磷酸酶的定量检测。
  
  应用领域:
  
  1碱性磷酸酶发光检测;
  
  2.ELISA化学发光检测;
  
  3.WB化学发光检测;
  
  4.其他酶联化学发光反应检测。
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